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翌圣生物PEI轉染試劑之瞬時轉染步驟

 更新時間:2024-08-22 點擊量:678

細胞瞬時轉染是一種常用的實驗技術,用于將外源DNARNA導入細胞內,以研究基因表達、功能和調控機制。以下是細胞瞬時轉染的一般步驟和注意事項。今天讓我們一起探討轉染效率低下的原因,以為提高轉染效率

一、翌圣生物PEI轉染試劑瞬時轉染步驟一

提前一天鋪板,并且確保細胞均勻分布,具體鋪板技巧,請翻看之前文章,細胞鋪板總是鋪不均勻?別急,方法來了!轉染前將細胞培養至70-80%的密度,以確保細胞處于活躍的生長狀態。

二、翌圣生物PEI轉染試劑瞬時轉染步驟二

轉染試劑和質粒準備:根據轉染試劑的說明書準備轉染試劑和質粒DNA。轉染試劑的用量通常根據細胞類型和轉染效率來確定,一般為2-10μL/孔(對于24孔板)。質粒DNA的用量通常為0.1-1μg/孔(對于24孔板),具體用量需根據實驗目的和轉染效率進行優化。

三、翌圣生物PEI轉染試劑瞬時轉染步驟三

混合轉染試劑和質粒:在無菌條件下,將轉染試劑和質粒DNA混合在無血清培養基中,質粒和轉染試劑混合后需用槍輕輕混勻,輕輕混合后孵育5-30分鐘,以形成轉染復合物。

四、翌圣生物PEI轉染試劑瞬時轉染步驟四

轉染復合物添加到細胞:將轉染復合物添加到細胞培養孔中,輕輕搖動以確保均勻分布。

五、翌圣生物PEI轉染試劑瞬時轉染步驟五

孵育:將細胞培養板放回培養箱中,孵育一定時間(通常為24-48小時),以便DNA進入細胞并表達。

六、翌圣生物PEI轉染試劑瞬時轉染步驟六

觀察和分析:根據實驗目的,可以通過可熒光顯微鏡下通過熒光觀察轉染效率或提蛋白跑WB進行驗證。

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七、翌圣生物PEI轉染試劑瞬時轉染部分產品列表

貨號

產品名稱

規格

40816ES02

線性PEI轉染試劑(速溶型)MW40000

100 mg


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